重磅！日本 On-Chip 公司推出液滴生成儀

瀏覽次數：11084　發布日期：2016-8-1　來源：本站　本站原創，轉載請注明出處

近年，油包水（W/O）乳化液滴被特殊的應用于遺傳分析的最小反應體積，例如數字PCR（dPCR）及下一代測序（ NGS ），藥物研發的基礎及應用，逐漸增加的以細胞為基礎的高通量篩選需求及高內涵篩選可以同時進行生物活性及毒理分析，W/O被用于以細胞為基礎的高通量篩選，例如生物活性及毒理評估，所謂的體外區分（IVC）方法可以更有效及經濟的評估通過微尺度上精簡實驗，從而使酶反應或胞內信號轉導在單個液滴中進行。

日本On-Chip公司最新推出的液滴生成儀可用在包裹細胞、細胞結構、細菌，包裹of Cdna,肽、物質庫，乳化液滴數字PCR等多個領域，它不僅可以通過乳化液滴分離單細胞，還可通過乳化液滴進行數字PCR。

On-Chip液滴生成儀

液滴生成儀原理：
☆ 生成相同及穩定的液滴
能夠產生穩定及相同大小的液滴使用我們一次性微流控芯片
☆ 通過壓力調節的液滴大小調節
通過樣本或油的壓力控制調節液滴尺寸大小
☆ 通過顯微鏡單元監測液滴生成
實時監測液滴生成

On-chip液滴生成儀技術參數：

實例說明
1,、液滴生成器生成數字PCR 乳化液滴
系統和試劑
　　・On-chip 液滴生成器
　　・油滴生成器(基于礦物油) 　　　　　　               ・PCR 試劑
    -礦物油（Light Oil, Sigma, M8410)                  -DNA 模版
   -Sun Soft No. 818SK (Taiyo Kagaku)                 -引物
    -Span 80 (Sigma, S6760)                            -SsoFast™ EvaGreen® Supermix (Biorad)
過程
　　・分離生成的包括PCR試劑在內的油滴和樣本到芯片上，并在 On-chip 生成器上設置　
    ・運行軟件并開始運行液滴生成
　　・通過壓力設定控制液滴大小　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
系統
　　・PCR 熱循環儀

2、分離和鑒定微生物的油包水乳化液
通過創建一個細菌或細胞可以生長的水/油乳化液滴環境,可以分離和鑒定目標微生物系統和試劑
　・E. coli 表達 GFP在PBS+Km 溶液中，(約一個液滴一個細胞)
　・E. Coli 濃度設定1x106 pcs/ml
　・礦物油, Span80 4.5%, Tween 0.4%, TritonX-100 0.05%
　・液滴生成; 樣本: 7.3kPa,
　・剪切力: 9.5kPa -> about 40 uM

液滴可在芯片庫中存儲達20小時