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生物化學技術專題:秦皮中七葉苷、七葉內酯的提取、分離和鑒定

瀏覽次數:6497 發布日期:2014-1-9  來源:上海北諾生物科技有限公司
 秦皮為本樨科白蠟樹屬植物白蠟樹(Fraxinus Chinensis Poxb)或苦瀝白蠟樹(F.rhynchophylla Hance)或小葉白蠟樹(F.bungeana DC)的樹皮,味苦,性微寒。具有清熱、燥濕、收澀作用。主治溫熱痢疾、目赤腫瘤等癥。
 
秦皮中含有多種內酯類成分及皂苷、鞣質等,其中主要有七葉苷、七葉內酯、秦皮苷及秦皮素等。多有抗菌消炎的生理活性,七葉內酯對細菌性痢疾、急性腸炎有較好治療效果,兼有退熱作用,毒付作用小,幾無苦味。適于小兒服用。
 
秦皮中主要成分的結構及性質
1.七葉苷(esculin),又叫馬粟樹皮苷:白色粉末狀結晶,mp205~206℃。易溶于熱水(1:15),可溶于乙醇(1:24),微溶于冷水(1:610),難溶于乙酸乙酯,不溶于乙醚、氯仿。在稀酸中可水解。水溶液中有藍色熒光。
 
2.七葉內酯(esculetin):黃色針狀結晶,mp276℃。易溶于沸乙醇及氫氧化鈉溶液,可溶于乙酸乙酯,稍溶于沸水,幾不溶于乙醚、氯仿。
 
3.秦皮苷(fraxin):mp205℃。
 
4.秦皮素(fraxetin):mp227~228℃。
 
實驗原理
七葉苷、七葉內酯均能溶于沸乙醇,可用沸乙醇將二者提取出來,再利用二者在乙酸乙酯中的溶解性不同而分離之。
 
實驗方法
(一)提取:取秦皮粗粉150g于索氏提取器中,加400ml乙醇回流10-12小時,得乙醇提取液,減壓回收溶劑至浸膏狀,即得總提取物。
(二)分離:在上述浸膏中加40ml水加熱溶之。移于分液漏斗中,以等體積氯仿萃取二次,將氯仿萃取過的水層蒸去殘留氯仿后加等積乙酸乙酯萃取二次,合并乙酸乙酯液,以無水硫酸鈉脫水,減壓回收溶劑至干,殘留物溶于溫熱甲醇中,濃縮至適量,放置析晶,即有黃色針狀結晶析出。濾出結晶。甲醇、水反復重結晶,即得七葉內酯。
 
將乙酸乙酯萃取過的水層濃縮至適量,放置析晶,即有微黃色晶體析出。濾出結晶。以甲醇,水反復重結晶,即得七葉苷。
 
(三)鑒定:
1.化學檢識:取七葉苷、七葉內酯各少許分別置試管中,加乙醇1ml溶解。加1%FeCl3溶液2-3滴,顯暗綠色,再滴加濃氨水3滴,加水6ml,日光下觀察顯深紅色。
2.薄層鑒定:
   吸附劑:硅膠G
樣品:七葉苷、七葉內酯標準品及自制七葉苷﹑七葉內酯的醇溶液。
展開劑:甲醇-甲酸乙酯-甲苯(1:4:5)
顯色:1)UV254燈下觀察,七葉苷為灰色熒光,七葉內酯為灰褐色。
 
2)以重氮化對硝基苯胺噴霧顯色,七葉苷和七葉內酯均呈瑪瑙色。
結果:七葉苷Rf=0. 04,七葉內酯Rf=0.28
發布者:上海北諾生物科技有限公司
聯系電話:021-57730393,15800960770
E-mail:beinuobio@163.com

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