韩国免费A级作爱片无码_亚洲欧洲精品成人久久av18_亚洲国产成人AV毛片大全_成年人在线免费看的惊悚动作片_一级爽片_爱爱免费

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 細胞技術專題:腫瘤細胞原代培養實驗

細胞技術專題:腫瘤細胞原代培養實驗

瀏覽次數:1201 發布日期:2014-2-25  來源:上海北諾生物科技有限公司

腫瘤細胞原代培養可以:(1)研究癌變機理;(2)研究抗癌藥檢測;(3)研究癌分子生物學;(4)用于闡明和解決癌癥。

詳細
實驗方法
  • 組織塊法
  • 酶消化法
  • 脫落細胞法
實驗方法原理 腫瘤細胞的原代培養與正常細胞的原代培養的條件基本相似。一般常用原代細胞的基礎培養基,10%血清濃度即可,在原代培養時需加入原代細胞培養的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)以利細胞生長。用細胞生長因子如胰島素、氫化可的松、雌激素等等。也可以考慮動物媒介培養。根據細胞種類不同選用不同的促細胞生長因子。
實驗材料
試劑、試劑盒
儀器、耗材
實驗步驟
一、將取得的瘤組織去除脂肪、結締組織及壞死部分。

二、在平皿中用Hanks液洗3次,剪碎組織,切成1-2 mm3 小塊。

三、接種于培養瓶(或皿)中,37℃、5%CO2 或加蓋并塞在普通恒溫箱中培養。
展開 
其他
一、對腫瘤細胞系或細胞株的評價
 
已建成的各種腫瘤細胞系或細胞株,無疑都是可用的實驗對象。近年我國已建成的腫瘤細胞系已非常多,并獲得越來越廣泛的應用。但根據研究者的經驗,在使用這些細胞系時,應持特別審慎態度,主要是應考慮到這些細胞在長期傳代中有否發生遺傳性改變的可能。眾所周知,長期傳代細胞系染色體核型常是不穩定的。另外也可能發生如基因突變、基因易位或缺失等變化。其結果可能導致細胞產生生物學性狀上的變動。
 
以近年建成的各種腫瘤細胞系為例,都已傳代少則幾十,多則百代以上后,才確認建成了細胞系。這種情況下很難保證細胞從初代到建成時的性狀仍是一致的。已如前述,癌細胞在培養中并非能很順利地傳下去,凡已長期傳代的細胞系,都已獲得不死性。當前尚未完全確證所有癌細胞都具有不死性;因此尚難肯定在長期培養中的癌細胞的生物學性狀與體內時仍完全相同(包括不死性)。據上述對用癌細胞系所獲實驗結果應盡量做分析性的結論,避免做概括性的與體內等同的結論,外推與體內等同更是不妥的。廣泛來說,應用各種較長時間培養細胞做實驗時,都應如此。

二、提高腫瘤細胞培養存活率和生長率措施
 
根據人們的經驗,腫瘤細胞在體外不易培養,建立能傳代的腫瘤細胞系更為困難。當腫瘤組織或細胞初代接種培養后,常出現以下幾種情況:
 
1.  完全無細胞游出或移動;
 
2.  有細胞移動和游出,但無細胞增殖,細胞長時間處于停滯狀態以致難以傳代;
 
3.  有細胞增殖,傳若干代后停止生長或衰退死亡;
 
4.  傳數代后細胞增殖緩慢,經過一段停滯期后,才又呈旺盛生長狀態,形成穩定生長的腫瘤傳代細胞系。
 
以上現象說明腫瘤細胞對體外生存條件有較高的要求,并需經過對新環境的適應才能生長,因此欲獲得好的培養效果,不能局限于一般培養法,必須采用一些特殊的措施。
 
1.  適宜底物
 
把經過純化的細胞接種在不同的底物上,如鼠尾膠原底層、飼細胞層等。
 
2.  生長因子
 
應用促細胞生長因子,向培養液中增加一種或幾種促細胞生長因子。根據細胞種類不同選用不同的促生長物,常用有胰島素、氫化可的松、雌激素以及其它生長因子。
 
為提高腫瘤細胞對體外培養環境的適應力和增加有活力癌細胞(干細胞)的數量,可采用動物體轉嫁接種成瘤后,再從動物體內取出進行培養,能提高體外培養的成功率。受體動物以裸鼠最好。
 
3、動物體媒介培養方法
 
(1)瘤塊接種:取新鮮瘤組織,用 Hanks液洗凈血污,切成 1~3毫米小塊,用穿刺針頭吸一小瘤塊,用酒精棉球擦拭動物腹部后,直接刺入皮下,注入瘤塊。
 
(2)飼養觀察,待腫瘤生長達較大體積后,剝取出瘤組織。
 
(3)進行體外培養。
 
(4)為防止失敗,仍取部分瘤組織繼續在裸鼠體內傳代。通過裸鼠媒介接種,有活力的腫瘤細胞數量增多,細胞培養易于成功。
 
發布者:上海北諾生物科技有限公司
聯系電話:021-57730393,15800960770
E-mail:beinuobio@163.com

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 玩弄少妇高潮ⅹxxxyw | 欧美在线看片 | 亚洲伊人一区二区 | 97影院理论午夜伦不卡 | 天天操福利视频 | 香蕉久久影院精品欧美日韩 | 国产午夜福利在线观看视频 | 欧美肥老太交性506070 | 在线观看不卡视频 | 小明看国产 | 亚洲AV无码国产在丝袜线观看 | 两个黑人大战嫩白金发美女 | CHINASEX喷水VIDEOS中国少妇 | 国产清纯女高中生被c | 欧美精品一区二区三区国产精品 | 亚洲欧美日韩一区二区在线观看 | 欧美国产日韩A在线视频Y | 久草在线观看首页 | 插插射啊爱视频日a级 | 沦为公交两奶头春药高潮迭起 | 四川少妇BBW搡BBBB槡BBBB 欧洲精品成人免费视频在线观看 | 精品一区二区三区四区蜜桃 | 欧美日韩中文字幕一区二区 | 在线日产精品一区 | 欧美日韩在线看 | 日本暖暖视频 | 婷婷久久综合九色综合绿巨人 | 欧洲精品成人免费视频在线观看 | 无码国产偷倩在线播放 | 麻豆TV入口在线看 | 日韩高清免费在线 | 无码国内精品人妻少妇蜜桃视频 | 91原创视频在线观看 | 无码av一区在线观看免费 | 欧美牲交A欧美牲交aⅴ久久 | 性xxxxfreexxxxx国产 | 国产v欧美Ⅴ日韩v在线观看 | 最新亚洲精品国偷自产在线 | 大胸美女污污污www网站 | 激情综合网俺也去 | 还珠格格第二部1至48集免费观看 |