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大鼠冠狀動脈平滑肌細胞操作步驟及注意事項

瀏覽次數:262 發布日期:2021-7-21  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
大鼠冠狀動脈平滑肌細胞完全培養基操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量胰酶,使胰酶的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去胰酶,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止胰酶作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
注意事項:

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。

3. 請用相同條件的培養基用于細胞培養。培養瓶內多余的培養基可收集備用,細胞傳代時可以一定比例和自備的培養基混合,使細胞逐漸適應培養條件;建議使用派瑞金的完全培養基。

4. 建議收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態。

5. 該細胞只能用于科研,不得用于臨床應用。
發布者:上海一研生物科技有限公司
聯系電話:021-69985186
E-mail:3004979817@qq.com

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