使用動物源胰酶，我需要面對什么？

PART01

1.外源病毒趁機而入

動物源性蛋白質可能夾雜哺乳動物病毒，大多數生物制藥純化工藝的純化流程都有病毒失活步驟，但有些病毒對典型的病毒滅活方案特別有抵抗力。此外，一些活病毒疫苗不能通過病毒滅活步驟。病毒污染風險依舊伴隨動物源胰酶的使用存在。

表1.主要病毒滅活工藝和去除方法

2010年的G公司和M公司的兩種已獲批準的小兒輪狀病毒疫苗被報道含有豬病毒DNA序列污染，隨后被歸因于用于制造疫苗的細胞庫中使用胰蛋白酶。由于尚不知道這種豬病毒會傳染給人類，疫苗仍在市場上銷售。病毒的污染風險是使用動物源原料無法避免的問題。

PART02

朊病毒、支原體等污染也不容小覷

（1）朊病毒風險

圖1.朊蛋白同化

朊病毒蛋白質不能輕易被移除或滅活，檢測也很困難。這種風險很難評估，對朊病毒通過生物制品傳播的擔憂無疑是推動生物制藥生產向無動物源(AOF)試劑發展的主要因素。

（2）支原體污染

圖2.支原體結構

使用動物源胰蛋白酶制劑還可能帶來支原體等污染物，最常見的是豬支原體。其可以在胰蛋白酶溶液中存活，因此，使用豬源性胰蛋白酶有可能給培養的細胞帶來支原體污染。

PART03

法規與監管雙重壓力

對于那些開發使用動物源性胰蛋白酶的工藝，現在可能還存在額外的監管障礙：

圖3.CBER關于動物源胰蛋白酶要求

CBER工業指南有一個關于胰蛋白酶的章節，指出應根據胰蛋白酶是牛源還是豬源進行額外的檢測。

圖4.歐洲藥品管理局關于動物源胰酶的說明

歐洲藥品管理局發布的關于在人類生物藥品生產中使用豬胰蛋白酶的指南草案建議使用兩種不同的細胞系來測試可能在豬胰蛋白酶中發現的不定因子，需要做額外的測試。

PART04

走出困境靠什么——重組胰酶

要解決動物來源的問題，最有效的方法之一是采用重組技術生產，利用微生物生產重組胰酶是更為安全的替代產品。由于排除了動物來源的原料，在產品純度、活性以及穩定性上有了很好的提升和保證。