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脂多糖(LPS)的提取及純化的過程和方法

瀏覽次數:1689 發布日期:2023-4-23  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)根據О-特異性側鏈的存在與否可分為光滑型smooth-form,S-LPS用粗糙型rough-form,R-LPS兩大類前者的組成成分有類脂A、核心寡聚糖及О-特異性側鏈而后者僅含有類脂A及完整或部分核心成分。這兩類LPS分子在某些物理特征上表現出顯著的差異性主要表現為表觀分子量及水溶性方面。
 

脂多糖(LPS)的提取與純化


純度對于研究LPS的物理、化學及生物學特性是至關重要的因為細菌其他成分的污染可影響LPS的物理特性及生物學活性。LPS制劑中最常見的污染物質是核酸、蛋白質及多聚糖這類污染物質存在的量取決于LPS的提取和純化方法。

70年代以前提取LPS最常用的方法為Westphal等于1952年介紹的酚水法phenol water,PW),用這一方法提取的LPS純度較高。污染蛋白質含量僅為1~3%而在此以前所應用的方法如三氯醋酸法超聲波法、正丁醇提取法等所提取得到的LPS蛋白污染量可超過10%因而PW方法是一種較為有效的方法。

自1969年Galanos 等介紹苯酚-氯仿-石油醚phenol-chloro-form-petroleum ether,PCP法后LPS的純度又得到了顯著的提高。一方面經PW法提取得到的S-LPS可以PCP法純化另一方面R-LPS由于脂溶性成分的含量較高因而可直接應用PCP法進行提取與純化。PCP法可去除LPS中常見的污染物質。最終得到的純化LPS不含核酸及多聚糖蛋白含量亦可控制在1%以下。

LPS中存在的另一類污染物質為無機金屬離子及小分子量多胺成分它們的存在可影響LPS的物理性狀及生物學活性。應用電透析可將這類成分除去。

發布者:科德角國際生物醫學科技(北京)有限公司
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