在培養(yǎng)貼壁細(xì)胞的時(shí)候，偶爾會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞接種后貼壁不均勻的情況。有的地方長得非常密集，有的地方卻太稀疏。雖然這對(duì)于常規(guī)培養(yǎng)并不算大問題，但有時(shí)則可能影響后續(xù)的實(shí)驗(yàn)進(jìn)程。
所以一旦遇到貼壁不勻，建議排查原因并優(yōu)化操作方案。
 
本文中，小尚將細(xì)胞貼壁不均勻總結(jié)歸納為四種情況：
 

• 局部生長密集，密集處呈不規(guī)則分布

 

• 原因：一般是接種時(shí)沒有混勻，或者細(xì)胞傳代時(shí)沒有消化徹底從而形成細(xì)胞團(tuán)塊導(dǎo)致的
• 解決方案：繼續(xù)培養(yǎng)1-2天，待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，重新消化接種，接種時(shí)注意使用十字法或8字法混勻，接種后顯微鏡下確認(rèn)細(xì)胞是否分散為單個(gè)細(xì)胞。
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• 培養(yǎng)器皿中央生長密集，邊緣稀疏

 

• 原因：十字法或8字法混勻時(shí)搖晃次數(shù)過多，液體形成漩渦所導(dǎo)致
• 解決方案：繼續(xù)培養(yǎng)1-2天，待細(xì)胞狀態(tài)穩(wěn)定后，重新消化接種。在混勻時(shí)搖晃5-6次即可。
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• 細(xì)胞在培養(yǎng)器皿的半邊生長，形成明顯分界線

 

• 原因： 這可能是培養(yǎng)箱架子不平造成的
• 解決方案：可通過調(diào)節(jié)培養(yǎng)箱架子以保持水平解決。
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• 細(xì)胞形成同心圓，并靠邊緣生長
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• 原因：這是由于培養(yǎng)箱風(fēng)扇故障或設(shè)備震動(dòng)導(dǎo)致
• 解決方案：在培養(yǎng)器皿下面墊泡沫板或在架子上放重物可以有所緩解，檢查培養(yǎng)箱風(fēng)扇是否正常運(yùn)轉(zhuǎn)。

 
總之，細(xì)胞貼壁不均勻可能是多種因素造成的，對(duì)于前兩種情況，一般是傳代操作造成的，重新接種即可解決；而后兩種情況是硬件設(shè)施造成的，則需要調(diào)試設(shè)備。

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