目前常用的KLA測定方法有直接法、動態法與亞硫酸鈉氧化法。本文重點介紹利用亞硫酸鈉模擬細胞耗氧，結合連續培養的穩態，簡便快捷地進行了KLA值的測定。

 在催化劑鈷或銅離子離子存在時，亞硫酸鈉能迅速被氧化為硫酸鈉。利用這個特點，在反應器連續通氣攪拌的條件下，可將亞硫酸鈉以一定速度連續注入反應器中，此時耗氧率可以通過注入亞硫酸鈉的速率計算得到

 隨耗氧劑的不斷加入，反應器中的溶解氧被消耗，溶氧值下降，從而形成反應器內液相的傳氧推動力。處于連續培養穩態時，反應液中的溶 氧濃度恒定不變，即dc/dt為零，所以此時供氧與耗氧相等。從而經過公式轉變，得到KLa的計算公式：

實驗條件

檢測儀器及設備：百侖生物10L玻璃發酵罐，溶氧電極、蠕動泵、溢流裝置、溫控系統及記錄系統等組裝成實驗系統。通過調節攪拌轉速和通氣量，提供不同的供氧條件。分別加入用蒸餾水現配的0.05mol/l亞硫酸鈉溶液做耗氧劑，由溶氧電極監測反應液中溶氧濃度變化情況，以溢流管維持恒定的反應液體積。由于溫度會影響檢測結果，因此全程保證溫度一致。

操作方法

實驗時先在反應器中加入一定量的7L蒸餾水，然后向反應器中加入5ml,1mol/l CuSO4溶液，連續通氣15min，使反應液中溶解氧達到飽和狀態。校正溶氧電極輸出為100%,并自動記錄。 將新配制的亞硫酸鈉溶液經蠕動泵加入反應器，通氣量經流量計閥門調節，攪拌轉速在100~800rpm間調節。根據供氧能力的差別，相應改變蠕動泵的轉速，使每個操作條件下，均能達到穩態。待溶氧濃度恒定后，記錄C/C*值。

動態計算KLa的方法

 OTR是發酵中設施供氧的能力或者狀態，OUR是細胞攝氧的水平或狀態。因此OTR相當于KLa與C*-C的積。所以當DO上升時，代表OTR大于OUR，反應亦然。

 當尾氣氧含量可以檢測時，便可以通過空氣流量，空氣氧含量及尾氣氧含量等指標進行質量守恒，便可以計算出OUR。dc/dt可以通過溶氧的變化進行計算得到。比如在1小時內，DO從70%，降低到60%，那么通過計算10%DO相當于的氧濃度變化，可以計算出。C*-C也可以通過35%DO（60%和70%的均值為65%，與100%的差值是35%）相當于的氧濃度變化得到。這樣便可以動態的計算出KLa，那么OTR，就可以通過KLa和C*-C得到。