ITS和ITSE等無血清培養(yǎng)基添加物在細胞體外培養(yǎng)的應用
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| 我們知道，細胞體外培養(yǎng)時需要在培養(yǎng)基中加入血清，以維持細胞的生長和存活。血清，尤其是牛血清，因成分復雜、批間差大和存在病原體污染的可能性等原因廣為人們所詬病，而無血清培養(yǎng)基添加物卻日益受到科研和生物制藥用戶的青睞。BioGems(PeproTech旗下品牌)為您提供多種無血清培養(yǎng)基添加物 (見下表)。 |
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| ≡ ITS ≡ |
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| ITS (Insulin-Transferrin-Selenium 胰島素-轉鐵蛋白-硒)是BioGems推出的第一種無血清培養(yǎng)基添加物混合裝，除含有胰島素和轉鐵蛋白外，還含有另一種無血清培養(yǎng)基必須添加物---硒 (Selenium)。硒是一種微量元素，是谷胱甘肽過氧化物酶、硫氧還蛋白還原酶和其他抗氧化物酶的關鍵組分。 |
| ≡ ITSE ≡ |
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| ≡ 胰島素//Insulin ≡ |
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| 胰島素(Insulin)由Sir Frederick Grant Banting和Charles H Best于1921年發(fā)現，因其特異性由胰島β細胞分泌而得名。 |
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| Insulin結構圖 |
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無血清培養(yǎng)基中，胰島素為必加組分，它可以促進無血清細胞培養(yǎng)液中細胞的生長，調節(jié)細胞對葡萄糖、氨基酸和脂類的攝取、利用和儲存，同時抑制糖原、蛋白質和脂肪的分解。需要注意的是，胰島素對細胞的促生長作用主要是通過其與細胞膜上胰島素樣生長因子(Insulin-like growth factors, IGFs)受體相互作用而介導的；而對細胞的代謝調節(jié)作用主要是通過其與細胞膜上的胰島素受體(Insulin receptor, IR)相互作用而介導的。此外，胰島素也可通過IGFR與IR的介導，發(fā)揮抗凋亡作用。
體外培養(yǎng)不同類型細胞時，無血清培養(yǎng)基中所添加的胰島素量也有所區(qū)別，一般在1-10mg/L之間。
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| ≡ 轉鐵蛋白//Transferrin ≡ |
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| 轉鐵蛋白(Transferrin)于1945年首先在人血清中發(fā)現，為無血清培養(yǎng)基必需添加物組分，通過與轉鐵蛋白受體(Transferrin Receptor , TfR) 相互作用，在無血清細胞培養(yǎng)過程中發(fā)揮重要功能。轉鐵蛋白能與三價鐵離子可逆性結合，調節(jié)鐵離子轉運及代謝，維持細胞內的鐵平衡。我們對轉鐵蛋白的轉鐵作用都很了解，但其實它最重要的意義在于維持細胞的生長和增殖，也就是說它有類似于生長因子的功能。而且，轉鐵蛋白也是一種重要的胞外抗氧化劑，可以避免細胞外環(huán)境中自由基的產生，防止細胞受到傷害。 |
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| Transferrin結構圖 |
| BioGems的Transferrin 為Holo-transferrin， Holo-transferrin 除發(fā)揮轉鐵作用外，自身即可作為細胞的鐵源，無需在培養(yǎng)基中添加外源性鐵。不同細胞，對轉鐵蛋白的需求量不同，一般原代細胞的推薦濃度為5 -100mg/L；中國倉鼠卵巢細胞(CHO)推薦濃度為10 -50mg/L；雜交瘤和Vero細胞推薦濃度為5 -20mg/L。具體使用濃度還是要根據細胞的種類、狀態(tài)和想要實現的功能來通過實驗確定。 |
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