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DNA結(jié)合染料對(duì)細(xì)胞核的多色標(biāo)記技術(shù)的多種應(yīng)用

瀏覽次數(shù):2031 發(fā)布日期:2020-6-24  來(lái)源:本站 僅供參考,謝絕轉(zhuǎn)載,否則責(zé)任自負(fù)
DNA結(jié)合染料對(duì)細(xì)胞核的多色標(biāo)記技術(shù)
 

細(xì)胞核是動(dòng)物細(xì)胞器中最大的。在哺乳動(dòng)物細(xì)胞中,核的平均直徑約為6μm,約占總細(xì)胞體積的10%。核包含細(xì)胞的大部分遺傳物質(zhì),組織成多個(gè)長(zhǎng)線性DNA分子,與多種蛋白質(zhì)(例如組蛋白)復(fù)合形成染色體。這些染色體內(nèi)的基因是細(xì)胞的核基因組。核的功能是維持這些基因的完整性,并通過(guò)調(diào)節(jié)基因表達(dá)來(lái)控制細(xì)胞的活性,因此,核是細(xì)胞的控制中心。組成核的主要結(jié)構(gòu)是核被膜,它包圍整個(gè)細(xì)胞器并從細(xì)胞質(zhì)中分離出其內(nèi)含物的雙膜和核骨架。

 

標(biāo)記活細(xì)胞核

核綠 LCS1核橙 LCS1核紅 LCS1核黃(Hoechst S769121)是DNA選擇性和細(xì)胞滲透染料,用于分析活細(xì)胞中的DNA含量。與DNA結(jié)合后,這些染料的熒光明顯增強(qiáng)。它們可用于熒光成像,酶標(biāo)儀和流式細(xì)胞儀應(yīng)用。這些具有DNA結(jié)合力的染料可用于帶有適當(dāng)濾波片組的活細(xì)胞的多色分析。
 

我們最新研發(fā)的核紫 LCS1是一種發(fā)熒光的,DNA選擇性和細(xì)胞滲透性染料,用于分析活細(xì)胞中的DNA含量。當(dāng)與DNA結(jié)合后,核紫 LCS1的藍(lán)色熒光明顯增強(qiáng)。它可用于熒光成像,酶標(biāo)儀和流式細(xì)胞儀應(yīng)用。它被405 nm的紫外激光很好地激發(fā),并發(fā)出藍(lán)/藍(lán)綠色熒光,最大發(fā)射波長(zhǎng)約為440 nm,為配備405 nm紫激光源的流式細(xì)胞儀提供了出色的染料。該DNA結(jié)合染料可通過(guò)Pacific Blue 和BD Horizo​​n V450濾波片組用于活細(xì)胞的多色分析。
 

圖1.活體HeLa細(xì)胞圖像被Nuclear Green LCS1染色。用紅色熒光Cell Navigator 線粒體染色試劑盒對(duì)活HeLa細(xì)胞的線粒體進(jìn)行染色。

 

標(biāo)記死細(xì)胞核

核綠 DCS1核橙 DCS1核紅 DCS1是DNA選擇性和細(xì)胞不滲透染料,用于分析死細(xì)胞,固定細(xì)胞或凋亡細(xì)胞中的DNA含量。與DNA結(jié)合后,DCS1染料的熒光明顯增強(qiáng)。它們可用于熒光成像,酶標(biāo)儀和流式細(xì)胞儀應(yīng)用。這些具有DNA結(jié)合力的染料可用于具有適當(dāng)濾波片組的死亡、固定或凋亡細(xì)胞的多色分析。

圖2.使用Apopxin 深紅色染料在Jurkat細(xì)胞中檢測(cè)磷脂酰絲氨酸的活性。 熒光圖像:活細(xì)胞(藍(lán)色)被CytoCalcein Violet 450染色,凋亡細(xì)胞(紅色)被Apopxin 深紅色染色,壞死細(xì)胞(綠色)被Nuclear Green DCS1染色。 使用1μM星形孢菌素誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡3小時(shí)。 用Olympus熒光顯微鏡分別使用Violet,Cy5和FITC通道拍攝細(xì)胞的熒光圖像。 A:非誘導(dǎo)的對(duì)照細(xì)胞; B:星形孢菌素誘導(dǎo)的細(xì)胞的三重染色。
 

圖3.核綠 DCS1(Ex / Em = 503/526 nm,核橙 DCS1(Ex / Em = 514/555 nm)和核紅 DCS1(Ex / Em = 622/645。虛線是小牛胸腺DNA與碘化丙啶結(jié)合的發(fā)射光譜(Ex / Em = 535/617 nm)。

 

常用的細(xì)胞核染料

貨號(hào)# 品名 Ex (nm) Em (nm) 規(guī)格
1300 ReadiLink trFluor Eu抗體標(biāo)記試劑盒 346 617 2 Labelings
17510 DAPI 358 461 10 mg
17562 碘化乙啶HI 518 600 5 mg
17520 細(xì)胞核染料 Hoechst 33258 352 461 100 mg
17530 細(xì)胞核染料Hoechst 33342 350 461 100 mg
17537 細(xì)胞核染料Hoechst 34580 368 437 5 mg
17514 羥芪巴脒*DNA和RNA染料* 360 591 10 mg
17561 DNA染料 LDS 751 CAS 181885-68-7 543 712 25 mg
17543 核紫 LCS1 活細(xì)胞染料 401 459 0.5 ml
17550 核綠 DCS1 死細(xì)胞染料 503 526 0.5 ml
17540 核綠 LCS1 活細(xì)胞染料 503 526 0.5 ml
17551 核橙 DCS1 死細(xì)胞染料 528 576 0.5 ml
17541 核橙 LCS1 活細(xì)胞染料 514 555 0.5 ml
17552 核紅 DCS1 死細(xì)胞染料 642 660 0.5 ml
17542 核紅 LCS1 活細(xì)胞染料 622 645 0.5 ml
17539 核黃(Hoechst S769121)神經(jīng)元示蹤染料 355 495 25 mg
17515 碘化丙啶PI 535 617 25 mg

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