1、KDO的合成和附著
KDO的合成包括三個連續性反應：①5-磷酸-D-核酮糖↔5-磷酸-D-阿拉伯糖。②5-磷酸-D-阿拉伯糖+磷酸烯醇式丙酮酸→8-磷酸-KDO+磷酸。③8-磷酸-KDO+烷酸。這三步反應分別在5-磷酸-D-核酮酸異構酶、8-磷酸-KDO合成酶，8-磷酸酶催化下進行。位于染色體27分鐘處的kdsA基因編碼8-磷酸-KDO合成酶。

KDO在CMP-KDO合成酶催化下生成CMP-KDO活化形式，催化該步反應的酶是由位于染色體85分鐘處的kds B基因編碼的。CMP-KDO在雙功能或三功能蛋白WaaA 的催化下，將KDO結合到脂質Ⅳa的C-6'上，然后再將第二個KDO分子加到第一個KDO 分子上。

2.庚糖區和己糖區的合成
庚糖以ADP活化形式，己糖以UDP活化形式逐一加入核心多糖上。催化核苷酸單糖的糖基轉移酶屬于一系列膜相關糖基轉移酶，它們在細胞膜胞質面將糖基轉移到成熟的脂質A分子上。合成完畢的脂質A核心分子可能是在ABC轉運裝置[ATP-bindingcassette（ABC）transporter]的參與下從細胞膜的胞質面轉移到細胞膜的周質間隙面，在周質間隙面完成與O抗原多糖鏈的連接反應而生成完整的LPS分子。此外，脂質A核心也可作為腸道細菌共同抗原（entero-bacterial common antigen，ECA），以及大腸桿菌群莢膜K抗原多糖鏈的受體。
 

參與核心多糖合成過程中的糖基轉移酶或修飾酶是由一類稱為wa※※的基因編碼，它們位于染色體的81~82分鐘處，介于cysE和pyrE基因之間，這些基因分布在三個操縱子中。對于大腸桿菌五種核心結構而言，不同核心合成的基因組成和遺傳分布不同。

waaA操縱子包含編碼雙功能或三功能KDO轉移酶的結構基因waaA和一功能未知的相對分子質量為18000的多肽基因。gmhD操縱子中的gmhD、waaF 、waaC基因產物與內核庚糖區合成有關，waaQ操縱子則與外核己糖區合成和核心區的化學修飾有關。在大腸桿菌K-12中gmhD操縱子的轉錄受一熱休克啟動子的調節，waaQ操縱子的轉錄由該操縱子上游的一非翻譯區序列和轉錄延長因子RfaH共同正向調節。