韩国免费A级作爱片无码_亚洲欧洲精品成人久久av18_亚洲国产成人AV毛片大全_成年人在线免费看的惊悚动作片_一级爽片_爱爱免费

English | 中文版 | 手機版 企業登錄 | 個人登錄 | 郵件訂閱
當前位置 > 首頁 > 技術文章 > 膜片鉗實驗系統配置

膜片鉗實驗系統配置

瀏覽次數:5218 發布日期:2008-5-9  來源:本站 僅供參考,謝絕轉載,否則責任自負
一個電生理配置有4個主要的需求:

環境需求:保持標本的健康的手段。

光學需求:顯現標本以供觀察的手段。

機械結構需求:穩定定位微電極的手段。

電子學需求:放大和測量信號的手段。


我們將配置分成兩種類型的“典型”配置:胞外記錄和單通道膜片鉗記錄。

胞外記錄的配置

該配置主要用于記錄腦片的場電位。一般目標是將一個相對粗糙的電極放置在組織的胞外空間,同時盡可能模仿體內的組織環境。因此,需要一個相當復雜的小空腔,用來對組織進行溫暖、氧化、灌注。而另一方面,光學和機械結構需求則簡單得多。一個解剖用顯微鏡,至少15cm的工作距離(配合近似垂直放置的微操縱器),通常已經可以看到切片或大體的形態學特征。由于對定位時手的震動和電極的精確放置都沒有苛刻要求,微操縱器可以選用相對粗糙的機械類型。但是,在記錄過程中,微操縱器不允許有一點漂移和震動。

需要使用低噪聲的電壓放大器。由于信號的范圍可能在10 uV 到10 mV 范圍內,低噪聲電壓放大器的增益至少要達到1000。

單通道膜片鉗記錄配置

標準的膜片鉗配置在許多方面與胞外記錄恰好顛倒過來了。由于對環境的控制非常少,實驗通常在室溫下、一個無灌注的培養皿中進行。

光學和機械需求則根據實際的細胞的大小(10或20 um)有特殊的規定。顯微鏡應該有放大300或400倍的能力,并需要某種對照增強能力(Nomarski, Phase or Hoffman)。omarski(微分干涉)對于電極的精確放置是最好的,因為它的影像依賴于視野一個很窄的深度上,這有助于精確定位(定位不好,影像是模糊的)。Phase(相差法)用于精確定位程度要求低一些的場合,但提供了更好的對比度。Hoffman方法提供了較便宜的,稍微退化點的Nomarski版本。

最好使用倒置顯微鏡:

(1) 這樣能使電極頂端更容易被看到,因為物鏡在chamber的下方,

(2) 提供了更大更堅固的平臺,用來固定微操縱器。

微操縱器應提供良好的,平滑的移動(最多每秒2um)。對震動和穩定性的需求決定于記錄模式:是希望記錄cell-attached- patch,還是cell-free (inside-out or outside-out) patch。

在cell-free- patch中,微操縱器只需要在形成封接過程中保持穩定,一旦離開了細胞,穩定就不是那么至關重要了。這通常不到一分鐘。

單通道記錄的放大器比胞外記錄使用的要復雜得多。象Heka公司的EPC9,EPC10以及Axon公司的Axopatch200B都是非常優秀的膜片鉗放大器。

組織切片膜片鉗記錄配置

膜片鉗技術的近來擴展,切片膜片鉗技術,其配置需要是體外胞外記錄和常規膜片鉗配置的一個組合。例如,該技術可能需要一個chamber,需要連續對切片進行灌流和供氧。大部分的其他要求,與常規膜片鉗類似。光學需求與切片的厚度有關(thick-slice or thin-slice),對thick-slice,簡單的解剖顯微鏡就夠了;而對thin-slice,顯微鏡則需要提供400倍的放大,良好的頂端聚焦和對照增強。

設備放置:

電生理實驗人員傾向于在小房間的一角獨自工作。小房間通常比較安靜,震動和空氣流動被削減了。

首先放置顯微鏡是比較明智的,然后是密切聯系的附件,例如chamber,微操縱器和溫度控制系統(如果安裝了)。基本原則是第一要保證細胞恰當的處于靜止狀態,第二要確認從細胞記錄信息的行為沒有對細胞帶來連續的致命傷害。

第一原則可以通過良好的實驗環境幫助實現,第二原則通過良好的光學和機械手段實現。

在顯微鏡周圍工作,保持例如灌注閥門和微操縱器的控制要非常謹慎,避免震動。理想的情況是,它們放置在一個小架子上,該架子從防震臺延伸出來,保證在通過顯微鏡觀察細胞時,不會產生破壞的震動。

選擇和放置電子儀器是個人偏好的事情。最低的要求是只有一個放大器和一臺計算機,另外強調最好放置在一個儀器架上。一個示波器是重要的,因為,計算機通常不夠靈活;而且,示波器常能展現在計算機屏幕上看不到的一些意外情況,例如計算機的采樣率設置不合適時,就會丟失大量細節信息,而示波器則不會。

示波器應與眼睛水平,在示波器上面或下面直接放置微電極放大器,以便容易的調整和監視信號。

最后,計算機應放置得盡可能遠,但離顯微鏡還是應該保持在手臂來回夠得著的地方。這有助于削減顯示器的輻射噪聲,也能確保在使用鍵盤匆忙記錄時不至于肘部撞擊顯微鏡。

最后一般的建議,也許是最難注意的是:抵制十全十美的配置誘惑,只要有一半的可能性,就開始實驗。

用戶名: 密碼: 匿名 快速注冊 忘記密碼
評論只代表網友觀點,不代表本站觀點。 請輸入驗證碼: 8795
Copyright(C) 1998-2025 生物器材網 電話:021-64166852;13621656896 E-mail:info@bio-equip.com
主站蜘蛛池模板: 亚洲国产欧美在线人成aaaa | 国产激情久久久久影院老熟女 | 成人av综合亚洲 | 久久精品亚洲一区二区三区 | 免费哦观看av | 韩国三级中文字幕HD久久精品 | 亚洲国产初高中生女AV | 亚洲一区二区三区久久久久久 | 久久这里只精品99re66 | 丰满少妇猛烈进入A片99A | 91激情视频在线?看 欧美日韩免费专区在线 | 久久婷婷五月综合色国产 | 国产一级淫片a视频免费观看 | 伊人色婷婷五月天激情狠狠五月天 | 国产亚洲欧洲综合5388 | 欧美性猛交XXXX乱大交 | 丰满熟女人妻一区二区三 | 99久久免费只有精品国产 | 欧美成人精品一区二区男人小说 | 欧美一区二区三区性视频 | 中文色视频 | 欧美人c交zoozooxx | 麻豆传煤111133网站 | 高清重口变态sm在线观看 | 精品无码人妻一区二区三区视频 | 一级片手机免费看 | 在线视频91 | 色五月丁香五月综合五月亚洲 | 日韩欧美中文字幕国产 | 免费高清网站在线播放的注意事项 | 最近韩国日本免费观看mv百度 | 国产精品免费一级在线观看 | 日本三区四区 | 亚洲欧美成人久久综合中文网 | 精品亚洲一区二区三区 | 美女视频黄a视频全免费 | www.aa456.com亚洲 中国老太婆野外xxxx | 日韩欧美精品一中文字幕 | 国产乱码一区二区三区爽爽爽 | 日一区二区 | 国产a视频免费观看 |