指紋圖譜作為中藥復(fù)雜樣品體系質(zhì)量控制強有力的技術(shù)手段，能夠較全面反映中藥內(nèi)在質(zhì)量，已贏得國際上的廣泛認可并得到迅速發(fā)展。2010版中國藥典收載高效液相色譜特征圖譜7項，指紋圖譜13項，其中中成藥6項，提取物14項，為中藥產(chǎn)品質(zhì)量的控制開辟了新途徑，成為我國中藥企業(yè)的一次重大突破。

1、復(fù)方丹參滴丸

【指紋圖譜】色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗
用Waters^® ACQUITY UPLC^® HSS T3（柱長為100mm，內(nèi)徑為2.1mm，1.8μm）色譜柱；以含0.02%磷酸的80%乙腈溶液為流動相A，以0.02%磷酸溶液為流動相B，按中國藥典<一部>第907頁條件進行梯度洗脫；流速為每分鐘0.4ml；檢測波長為280nm；柱溫為40℃。理論板數(shù)按丹參素峰計算應(yīng)不低于8000。

2、三七三醇皂苷

【指紋圖譜】
按中國藥典<一部>第368頁條件運行，共有5個色譜峰，其中2號峰為三七皂苷R1，3號峰為人參皂苷Rg1，4號峰為人參皂苷Re，作為參照峰。色譜柱： Waters SymmetryShield™ RP₁₈， 5μm ，250×4.6mm。

3、生脈注射液、參附注射液

【指紋圖譜】色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗
固定相采用Waters SymmetryShield RP₁₈色譜柱（4.6mm×250mm；5.0μm）；柱溫30℃，以乙腈為流動相A，以水為流動相B，梯度洗脫；檢測波長為203nm。理論板數(shù)按人參皂苷Rb1峰計算應(yīng)不低于1350000。測定法 分別精密吸取參照物溶液和本品各10μl，注入液相色譜儀，測定。在8～95分鐘范圍內(nèi)，應(yīng)呈現(xiàn)十七個與生脈注射液對照指紋圖譜相對應(yīng)的特征峰。按中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)計算，以特征峰計算相似度，本品指紋圖譜與生脈注射液對照指紋圖譜比較，相似度應(yīng)不得低于0.80。另對供試品色譜圖中所有峰面積值高于人參皂苷Rb1峰面積值的百分之五的色譜峰進行積分，非特征峰面積之和不得高于總峰面積的50%。（見國家藥典委員會關(guān)于生脈注射液、參附注射液質(zhì)量標準有關(guān)內(nèi)容的公示）

中藥指紋圖譜研究的特點

適合中藥指紋圖譜研究的Waters色譜柱推薦

（1）適合中藥指紋圖譜研究的色譜柱推薦之T3

XSelect™ HSS T3，采用三官能團鍵合，低配基密度（~1.6 μmol/m2）C18 烷基鏈鍵合和專利的封端技術(shù)，是沃特世公司最先進的鍵合和封端技術(shù)的有力體現(xiàn)。

• 在增強極性化合物保留能力的同時，維持了對中等和強疏水化合物的適度保留能力，又稱“平衡柱”，能夠?qū)ν瑫r包含強極性和疏水性的復(fù)雜中藥組分提供適中的保留。
• LC-MS兼容
• 耐受100%水相流動相
• 分離重現(xiàn)性好

對應(yīng)的UPLC^®色譜柱為ACQUITY UPLC HSS T3，典型應(yīng)用如國家藥典委員會公示的護肝膠囊、護肝顆粒含量測定，用ACQUITY UPLC HSS T3（2.1×100mm，1.7μm）分析，要求理論板數(shù)按五味子乙素峰計算不低于150000。

（2）適合中藥指紋圖譜研究的色譜柱推薦之Shield RP₁₈

Shield RP₁₈色譜柱基于沃特世專利的內(nèi)嵌極性基團技術(shù)，能夠“屏蔽”（shield，英文有“護罩” 、“ 屏蔽” 的含義）硅膠表面的殘留硅醇基，使其不能與堿性較大的化合物發(fā)生拖尾作用。Waters Shield技術(shù)在硅膠顆粒和BEH顆粒上均高度成功，SymmetryShield RP₁₈色譜柱在pH2-8范圍內(nèi)提供獨特選擇性，峰形與分離度都顯著改善，并且完美兼容高水相條件；而BEH Shield RP₁₈更將此諸多優(yōu)勢拓展到pH2-11的寬范圍，為方法開發(fā)提供了極大靈活性。Shield RP₁₈對含有生物堿、極性組分等中藥體系都是良好的選擇，更有相對應(yīng)的ACQUITY UPLC色譜柱為獲得超高分辨率和實現(xiàn)快速分離提供保障。